黃酮類化合物分子量如何測(cè)定?
黃酮類化合物是一大類存在于植物中的次生代謝產(chǎn)物,具有多種生物活性。對(duì)于黃酮類化合物分子量的測(cè)定,通??梢酝ㄟ^以下幾種方法進(jìn)行:
1.質(zhì)譜法(Mass Spectrometry, MS):質(zhì)譜是測(cè)定分子量最直接、最準(zhǔn)確的方法之一。通過將樣品離子化后,在磁場(chǎng)或電場(chǎng)中根據(jù)其質(zhì)量與荷質(zhì)比的不同而被分離,從而可以精確地測(cè)得化合物的相對(duì)分子質(zhì)量。對(duì)于黃酮類化合物來說,常用的有ESI-MS(電噴霧電離質(zhì)譜)、MALDI-TOF MS(基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜)等。
2.核磁共振光譜法(Nuclear Magnetic Resonance, NMR):雖然NMR主要用于確定分子結(jié)構(gòu),但通過分析其信號(hào)也可以間接推斷出化合物的大致分子量。特別是當(dāng)結(jié)合使用^1H-NMR和^13C-NMR時(shí),可以更準(zhǔn)確地解析復(fù)雜黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)信息。
3.高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC):雖然HPLC主要用于分離純化及定性定量分析,但結(jié)合特定檢測(cè)器如蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)或質(zhì)譜聯(lián)用(MS),也可以用于輔助測(cè)定化合物的分子量。特別是對(duì)于那些在紫外光下沒有吸收特性的黃酮類化合物。
4.凝膠滲透色譜法(Gel Permeation Chromatography, GPC):這是一種根據(jù)分子大小來分離混合物的技術(shù),適用于聚合物和大分子物質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量分布測(cè)定。雖然不常用作單個(gè)黃酮分子量的直接測(cè)量手段,但對(duì)于研究黃酮類化合物的聚合狀態(tài)或純度有一定幫助。
5.元素分析法:通過對(duì)樣品進(jìn)行完全燃燒后測(cè)定其碳、氫、氮等主要組成元素的比例,并結(jié)合化學(xué)式的推算來估算分子量。此方法適用于已知結(jié)構(gòu)但需要驗(yàn)證理論與實(shí)際是否一致的情況。
綜上所述,質(zhì)譜法是目前最常用且最為準(zhǔn)確的黃酮類化合物分子量測(cè)定方法。在具體應(yīng)用時(shí),可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件和樣品特性選擇合適的技術(shù)手段。